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偏光顯微鏡的應(yīng)用

更新時(shí)間:2021-10-20點(diǎn)擊次數(shù):1210

偏光顯微鏡在物理化學(xué)中校用于方位角旋轉(zhuǎn)的測定和雙折射介質(zhì)中相仿差的測定。而它的準(zhǔn)確的定量應(yīng)用是在礦物學(xué)和巖石學(xué)中光袖的準(zhǔn)確斷定,在雙折射基礎(chǔ)上晶體的鑒定是省石學(xué)和礦物學(xué)中大量的經(jīng)常的工作。而在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中偏光顯微鏡被廣泛應(yīng)用的可能性是比較小的,部分是因?yàn)樯飳W(xué)標(biāo)本的各向異性比起無機(jī)物標(biāo)本是比較小的。另外,具有多于一個(gè)光軸的物質(zhì)在生物學(xué)巾也很少發(fā)現(xiàn)。


在生物體中,不同的纖維蛋自,例如膠原蛋白、彈力纖維(在—‘定的條件下)、張力纖維和肌肉中的肌原纖維等結(jié)構(gòu)顯示出明顯的各向黨性,它們都具有在長軸—亡的雙折射性。這些蛋白質(zhì)在應(yīng)用其他技術(shù)測定之前,已經(jīng)使用偏光顯微鏡得到了在這些纖維中分子排列的詳細(xì)情況。同樣,用電子顯微鏡n經(jīng)看到的神經(jīng)周圍由脂類和蛋白質(zhì)組成的儲(chǔ)期的可變雙分子膜層結(jié)構(gòu),現(xiàn)在己用偏光顯微鏡非常準(zhǔn)確地匠災(zāi)了,采用部分交叉的棱鏡觀察蘇木核染色的人延髓神經(jīng)細(xì)胞切片時(shí),在常規(guī)顯微鏡下不明顯的細(xì)胞間神經(jīng)纖維的雙折射髓鞘變得十分明顯。


對(duì)于具有品體構(gòu)造的生物學(xué)材料,例如淀粉粒,應(yīng)用偏光匝微鏡也可以進(jìn)行觀察。例時(shí),利用偏光顯微鏡還可以研究動(dòng)物和植物的活體細(xì)胞,最近紡距絲的比較微弱的雙折撲性質(zhì)(起因于紡題絲微管中蛋白質(zhì)分子的定向排列).已經(jīng)在很大程度L被用來研究細(xì)胞在不同分裂時(shí)期結(jié)構(gòu)上的定性和定量變化,并且使用又有高消光但的偏振棱鏡和牧強(qiáng)的光源,用縮時(shí)攝影可以記錄分裂周期中紡額體的變化。在一些特殊的生物學(xué)材料中,例如具毛•高雙折射的內(nèi)耳平衡器中的聽石,就會(huì)顯不出清晰的偏振光效應(yīng)(圖11.6)。


在偏光顯微鏡使用中應(yīng)注意下例事項(xiàng);


考慮到雙折射現(xiàn)象的重疊,用于偏光顯微鏡的切片厚度決不能超過10μm;組織塊


應(yīng)盡可能地切成三個(gè)互相垂直的平面;粘著切片材料時(shí)不應(yīng)使用蛋出——甘油粘著劑;由于石蠟的存在會(huì)嚴(yán)亞地破壞雙折射,因此使用二甲苯溶蠟的常規(guī)方法對(duì)于除去切片中殘存的石始是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的,必須采用把切片在本Ig——氯仿中50℃下處理2叫、時(shí)的方法*除去殘留的石蠟,用這種方法也可以除去現(xiàn)代包埋介質(zhì)中的塑料。另外在用于,偏光顯微鏡的切片中,除了石蠟外,其他的污物也應(yīng)該清除干凈。


偏光顯微鏡在測定呈現(xiàn)很微弱曲各向異性材料的情況下,應(yīng)該使用棱鏡代替片層偏振器;為了降低背景的光量,應(yīng)該使用反射較差的玻璃表面以及特殊的無熒光浸油,因?yàn)楸尘暗墓鈺?huì)減弱雙折射現(xiàn)象。


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